兜兰无菌播种繁殖方法详解

兜兰（PaPhboedilum）又称拖鞋兰，因其花中央的唇瓣膨大成袋状，似拖鞋倒挂而得名。世界上现已发现兜兰属中60多个原生种，其中百分之六十五的资源产于我国。80年代在我国云南发现的Paph.aniacum和Paph．micracum’Otani’多年来在国际兰展上屡获嘉奖，1994年1O月PaPh.ameniacum’Otani’在美国洛杉机举办的兰花展览会上获铜奖，现已成为畅销品种，以名贵价高而闻名。自80年代末期，在我国，上山大肆挖采兜兰原生种植株的情况不断发生，使得这一自然资源临于绝种的危险。自92年以来，我们利用培养技术对一些兜兰的原生种和杂交种进行无菌播种繁殖试验，成功地得到一批试管植株，并移栽成活。根据国际频危物种贸易协会规定，禁止所有野生的兜兰原生种进出口贸易，而人工繁殖的试管植株则不受这一限制，因此，无菌播种繁殖兜兰，既可挽救我国兜兰的自然种质资源，又能快速得到大量试管植株，为国际市场提供我国优良的兜兰种苗，为国家创收外汇，使这名贵兰花走入千家万户成为可能。 1．材料与方法 1．1品种材料：兜兰原生种与杂交种等1O多种，有8－9成成熟的种荚和已完全成熟，种壳破裂后的干种子。 1. 2消毒灭菌方法：依不同的材料，消毒方法分2种。 ①种荚 用次氯酸钠10％溶液为消毒液，因种荚表面长有许多细小绒毛，需在消毒液中不断刷洗，5分钟后，用无菌水冲洗4次，凉干待用。 ②种壳破裂后的干种子 用次氯酸钙15％液液，将干种子放入振摇10分钟，用无菌水冲洗4次。 种子经消毒后播于培养瓶中的培养基上。成苗后瓶苗从瓶中取出洗净，消毒液浸泡10分钟，稍凉干，以湿润的椰糠为植料，种植在透水性能好的塑料盆中，放置在阴凉通风的环境，2星期后，则可开始正常的淋水、施肥管理。 2．讨论 兜兰无菌播种技术中种子萌发率高和瓶苗移栽成活率高是成功的关键，他们受下面几个关键因素的影响。 1.1不同品种的影响 受遗传因素影响，品种差异直接影响种子的萌发率，原生种中象PaPh．wukhaklii萌发率较高，达95％，但Paph．nothschildianum萌发率仅有2O－5O％、杂交种中，亲本的亲缘关系愈近，种子萌发率愈高。 ②种子的成熟度 兜兰种子成熟需6个月至2年时间，依不同种类而变化。有的种子自授粉后，8个月已基本成熟，而有的需1－1．5年才成熟，最好采摘8－9成成熟的种荚，此时种壳尚未开裂，容易消毒灭菌成功，而其内的种子也已基本成熟，种子萌发率高。 ③黑暗培养 一定时间的黑暗培养促进种子的萌发，种子播入播种培养基后，必须首先放置在黑暗条件下培养，促进种胚的萌动，没有经历黑暗培养的种子萌发率明显较低或不萌动。 ④成苗培养香蕉促进根的生长 成苗培养中，在培养基中加入香蕉对试管苗的根系生长有很大的促进，没有香蕉的培养基中试管苗根少，瓶苗生势差，减低了移栽的成活率。在有香蕉的培养基中瓶苗有些长达10cm，而且健壮，出瓶后成活率达1O0％。(麦小燕)