采用17厘米×33厘米聚丙烯塑料袋的菌种制作方法在压块栽培生产种的制作中已作介绍。近几年来代料香菇生产在我国北方发展迅速，因气候条件等因素的不同，北方地区大多采用大袋栽培。大袋栽培因同样以塑料袋为容器进行菌种生产，故其操作注意事项及技术要点是一样的，但在一些具体操作上有所不同。
大袋栽培采用低压高密聚乙烯塑料筒袋，厚0.5～0.6毫米、宽22～25厘米、长55～58厘米，每袋装干料1.5～2.0千克。培养料配方：木屑80%，麸皮20%，石膏1.5%，石灰0.2%～0.3%,料水比1:0.9，以手握料指缝中有水迹但不滴下为宜。料袋灭菌是大袋栽培的关键技术环节，灭菌操作要坚持攻头、保尾、控中间的原则，保证6小时升温到100℃，开始时旺火猛攻，中间注意勤加热水、防漏气、不降温，文火保持100℃达18～20小时，最后旺火烧2～4小时，再闷1～2小时，待温度降到70～80℃时缓慢开门，出锅。灭菌时间与灭菌锅容积及菌棒粗度成正相关，随着锅容增大和菌棒加粗，应增加灭菌时间，一般保持100℃24小时左右，最长达40小时。接种采用三面9穴（3×3）接种，接种时应严格无菌操作，防止杂菌侵入接种穴。“井字形”堆叠发菌，堆距10厘米，高6～7层，接种后10～15天第一次翻堆，同时检查菌丝生长及杂菌感染情况，以后第10天翻一次堆。发菌的第一星期控制室温25～26℃，以后控制20～24℃，袋温24～26℃，严防袋温超过28℃；空气相对湿度控制在60%～65%，雨水多时室内放生石灰吸潮，并关闭门窗。当接种穴直径达8～10厘米时，可加大通风量，并松动菌种枝条，帮助通气，促进菌丝生长。
