灭菌后的塑料袋冷却20～30℃，而后装人接种箱(室)内，用2～3%的来苏水喷雾密闭半小时，或用紫外线灯照半小时。然后选用菌丝旺盛的栽培种。菌种要从严选择，确认没有被杂菌污染时，用酒精棉球将栽培种瓶外面彻底擦拭消毒后放入接种箱(室)内，用灭菌过的镊子把栽培种捣碎。在点燃的酒精灯的无菌区，把5～6克栽培种倒入盛料的塑料袋内，然后将塑料袋口按接种前原样塞上棉塞和包扎牛皮纸，操作时，动作要快速敏捷，以减少杂菌的侵染机会。