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兰花种子无菌播种技术研究

发布于2024-04-23 来源：农讯网: > 兰花 作者：
导读: 保山下山春兰新种红素。
一、蒴果处理
1、选取、预处理
选取授粉后一定天数的蒴果，一般采取外皮略黄，果皮无光泽的蒴果。
采回的蒴果，先在自来水下冲洗表面的泥沙、尘土等明显的污垢，再用棉花蘸取稀释的洗衣粉液搽拭表面及沟缝，再在自来水下冲洗15-30分钟，并用解剖刀切去前段（注意不要切太多，防止蒴果开裂）。
2、表面消毒
冲洗干净后的蒴果晾干后，在超净工作台上视情况而定。
a.蒴果较大且果皮厚、硬时，置于75%的酒精浸泡数秒至数分钟后取出灼烧灭菌，表面消毒烧干即可。
b.当蒴果较小时，先用75%的酒精浸泡5-10s，再放入滴加吐温的0.1%升汞消毒15-20min，然后再用无菌水冲洗蒴果4-5遍，每次1-2min，取出在灭菌好的牛皮纸生晾干。
二、播种
在超净工作台上将已经消毒的蒴果放在无菌垫盘上，用灭菌后的镊子镊住蒴果、解剖刀切去消毒好的蒴果两端（看到粉末状种子即可），再从勾缝处刨开蒴果，刮去蒴果内的种子，均匀的播散在培养基表面。
三、诱导培养
1、培养基
诱导的培养基常选用花宝一号和MS培养基，附加活性炭、蔗糖、琼脂，根据种类的不同配比的6-BA，NAA等，pH调至5.4-6.0。
2、培养条件
培养温度为26℃左右，前期暗培养或有散射光即可，在原球茎明显长大后，光照12h/d，光照强度为2000左右Lx。
播种一定天后，种子在诱导培养基上培养一定天数后开始萌动，但并不出现培根伸长，而是胚逐渐膨大，待种皮一端破裂，胀大的胚呈黄色，近似于愈伤组织，继续培养，胚表面布满许多小圆锥的拟原球茎状体。随培养时间的延长，小圆锥状球体逐渐壮大，形成绿色的圆球状的原球茎，可以用于增殖、继代和分化。
3、继代培养
在播种一定时间（约50-60d）后，种子萌发足够大的原球茎后诱导培养原瓶空间几乎被占满，以增大生长空间，即可开始分瓶。分瓶时应尽量将小苗分开，并使其在培养基中均匀分布。一般每（60-80d）分瓶一次。
四、壮苗生根培养
经数次继代培养，部分原球茎逐渐生长成具有1-2片小叶的小苗，有些小苗还有1-2条粗短的绿根，此时这些小苗还不能直接进行炼苗移栽，即可进行状苗培养。视兰花品种和株型大小添加香蕉泥、椰子汁等壮苗生根培养基内，继续培养，直至长大成具有3-5片叶，3-4条根，高5cm的小苗，后移栽驯化。
培养温度为26度左右，前期光照强度为2000左右Lx，光照时间12h/d。后期可利用太阳光的散射光，光照强度为(800-1000)Lx
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