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建立兰花快速繁殖体系的工作条件,并非高不可攀,业余爱好者可以因陋就简,完成全部或大部分的操作,自己培养兰花试管植株。
一、最低限度的必需用品和场地
没有最基本的条件和用品,组织培养是搞不成的。这类必需品,有的要购置,有的可自制。
1.必需品
(l)家用高压锅一个,用于培养基、无菌水等高压灭菌用,能有一个医用手提式高压灭菌锅更好。
(2)接种箱(无菌接种箱)一个,它制(方法及要求见后面);
(3)普通天平一架积量100克即可;
(4)不锈钢或铝锅一个(容量1~2升)煮制培养基用;
(5)培养用的各式瓶子和试管若干;
(6)酒精灯一盏,接种时灼烧灭茵用;
(7)20~25Cm长镊子l~2把接种用;
(8)解剖刀1~2把,刀片若干,接种用;
(9)小碟子5~10个,接种用;
(10)盛溶液瓶子若干;
(11)l,2,5ml移液管各l支;
(12)10,50,100,500ml量简各1只;
(13)水果榨汁器1只,榨取天然果汁作培养基用;
(14)脱脂棉,橡皮圈,牛皮纸等若干;
备有以上物品基本可以进行工作。
家用高压锅没有压力表,灭菌时先不加阀,烧至沸腾,10分钟后加阀,阀门喷气时计时,15~20分钟熄火,慢慢放气,灭菌即完成。
2、基本药品及用水
用水不必过分强调纯净,因为培养基在某种意义上只是类似土壤的作用。只要是杂质不多的,如清洁的河水,井水,溪水、自来水都可。
基本药品仅需购买最必要、最常用、用量较大的几种。
(l)MS培养基的大量元素,(共5种药品);
(2)普通酒精(灯用和表面灭菌用);
(3)调节PH值用的KOH和NaoH,Hcl,精密PH试纸(PH5.4~7.0);
(4)漂白粉或漂粉精一瓶;
(5)琼脂;
(6)白糖;
(7)福尔马林和高锰酸钾各1瓶,其他药品用量很少,而且要用分析天平称量,无须自
己配制,可向有关研究或生产部门购买配好的分装品,存放在家用冰箱中。
在兰花的培养中,常用KyotO配方,则药品更为简单,只需购花宝1号l~2包,蛋白胨或胰蛋日胨,即可免去配制mS母液的麻烦。
3、怎样培养
在业余情况下进行兰花无菌播种或培养,应充分利用自然条件。培养瓶接种好需要放在无日光直射的地方,但需要有较强的散射光。暗培养时用纸箱盖住。也可以用木条,玻璃自制一个小型光照培养箱,冬季气温低时,放进一两个灯泡以增加温度。
4、自制接种箱
用不多的材料,就可以做成一个正规的接种箱。材料可用木料,胶合板,玻璃或有机玻璃等。大小看实际需要,一般认600~700mm,宽400~450mm,高500mm。正面有两个伸手入内操作的孔.里面安上油套。外面有可以移动的盖子。里面顶上最好能安装1个8~20w的柴外灯,用于灭菌。再装一盏酒精灯,因此,箱子背面右下方,左侧面上方各留出一个直径为10cm的通气孔,下孔蒙上5~6层纱布(过气孔),上孔只蒙2~3层纱布(出气孔),以利空气流通。否则因箱内空间狭小,氧气不足,不久酒精就会熄灭。在熏蒸灭菌时,要把各通气孔道关闭封严。熏蒸灭菌的操作方法是:在每次使用前2~10小时,将2~4克高锰酸钾放在小广口瓶里,将10~20ml福尔马林倒入瓶中。即发生反应,福尔马林气体弥漫在箱内空间,起到杀菌的作用。操作前将小瓶取出。如能配合紫外灯灭菌,效果更好、使用安全。
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